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超微量分光光度計的工作原理:從光路設計到微量檢測

  • 更新時間2025-07-28
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  超微量分光光度計通過優化光路設計與微量檢測技術,實現了對極低濃度物質的精準測量,其核心原理可歸納為以下方面:
  一、光路設計:突破傳統,實現微量檢測
  液柱固定光程技術
  利用液體表面張力,在上下檢測板間形成固定厚度的液柱(如0.05mm或0.2mm),替代傳統比色皿。液柱高度作為光程,確保光路穩定,同時避免因光徑不一致導致的誤差。部分機型采用可變光程技術(如0.02-1mm動態調節),通過實時吸光度數據自動調整光程,擴展檢測濃度范圍。
  四光程檢測與全光譜掃描
  采用四光程設計提升檢測穩定性,減少光強波動對結果的影響。支持全光譜掃描(190-850nm),可同時檢測多個波長(如260nm核酸、280nm蛋白質、230nm鹽離子),通過多參數分析評估樣品純度與濃度。
  光源與檢測器優化
  配備高穩定性光源(如脈沖氙燈或LED),壽命長達5000小時以上,減少預熱時間與光強波動。檢測器采用紫外增強型CCD或硅光電池,響應線性范圍廣,可捕捉微弱信號(如0.5pg/μLdsDNA),同時避免飽和效應。
  二、微量檢測:從樣本處理到結果輸出
  超低樣本量需求
  僅需0.5-2μL樣本,直接滴加至檢測平臺,無需稀釋或耗材(如比色皿),顯著降低珍貴或稀少樣品(如RNA、蛋白質)的消耗成本。
  快速檢測與自動化
  檢測時間通常<10秒,支持高通量實驗需求。部分機型配備自動進樣器與智能軟件,可實現樣本自動加載、數據存儲與公式計算(如核酸濃度換算),減少人為誤差。
  抗干擾設計與環境適應性
  通過遮光罩、減震臺與恒溫控制(±1℃),避免環境光、振動與溫度波動對檢測的影響。內置暗電流校正功能,消除檢測器本底信號干擾。