UV紫外光度計(jì)的設(shè)計(jì)道理和事情道理,允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化,即儀器有一定的準(zhǔn)確度和度。如Eppendorf Biophotometer的準(zhǔn)確度≤1.0%(1A)。這樣多次測(cè)試的結(jié)果在均值1.0%左右之間變動(dòng),都是沒(méi)事了的。另外,還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測(cè)試時(shí),離子濃度過(guò)高,也會(huì)導(dǎo)致讀數(shù)漂移,因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液,如TE,可大大不變讀數(shù)。樣品的稀釋濃度同樣是不成忽視的因素:因?yàn)闃悠分胁怀杀苊獯嬖谝恍┘?xì)小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些個(gè)小顆粒的存在干擾測(cè)試效果。UV紫外光度計(jì)為了zui大水平減少顆粒對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值在0.1-1.。在此范圍內(nèi),顆粒的干擾相對(duì)較小,結(jié)果不變。從而意味著樣品的濃度不能過(guò)低,或過(guò)高(超過(guò)光度計(jì)的測(cè)試范圍)。zui后是操作因素,如混合要充分,否則吸光值過(guò)低,甚至出現(xiàn)負(fù)值;混合液不能存在氣泡,空白液無(wú)懸浮物,否則讀數(shù)漂移劇烈;必需使用相同的比色杯測(cè)試空白液和樣品,否則濃度差異太大;換算系數(shù)和樣品濃度單元選擇一致;不能采用窗口磨損的比色杯;樣品的體積必需到達(dá)比色杯要求的zui小體積等多個(gè)操作事項(xiàng)。

　　UV紫外光度計(jì)這個(gè)基團(tuán)就吸收一定頻率的紅外線(xiàn)，把分子吸收的紅外線(xiàn)的情況用儀器記錄下來(lái)，便能得到全面反映試樣成份特征的光譜，從而推測(cè)化合物的類(lèi)型和結(jié)構(gòu)。IR光譜主要是定性技術(shù)，但是隨著比例記錄電子裝置的出現(xiàn)，也能迅速而準(zhǔn)確地進(jìn)行定量分析。

　　安裝好UV紫外光度計(jì)后，檢查樣池位置，使其處在光路中（拉動(dòng)拉手應(yīng)感應(yīng)到每檔的定位），關(guān)好樣品室門(mén)，打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，預(yù)熱10分鐘，即可進(jìn)行測(cè)量。打開(kāi)樣品室門(mén)，將方式定于透過(guò)率檔，按0%T進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。從蒸餾水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的時(shí)候拿毛玻璃面。向比色皿內(nèi)注入少量試液，潤(rùn)洗三次，然后注入3/4至4/5的試液，用濾紙片擦干外壁所掛水珠。 將比色皿按順序放入樣品池。注意光面對(duì)光源。

　　UV紫外光度計(jì)是較為常用的一種數(shù)字顯示光度計(jì)。 它以碘鎢燈為光源，光柵為色散元件。可用波長(zhǎng)范圍是330~800nm，波長(zhǎng)精度2nm，波長(zhǎng)重現(xiàn)性為0.5nm，單色光帶寬6nm，吸光度顯示范圍為0~1.999，UV紫外光度計(jì)吸光度的精度為0.004(A=0.5)，試樣架可置四個(gè)吸收池。